EU Annex1

隔离器： 能够进行可重复的内部生物净化的外壳， 内部工作区符合 A 级条件， 提供其内部环境与外部环境（例如周围洁净室空气和人员） 的无间断的持续隔离。隔离器主要有两种类型：
i密闭隔离器系统通过与辅助设备的无菌连接而不是对周围环境开放来完成物料转移， 从而阻断外部污染物进入隔离器内部。密闭系统在整个操作中保持密封。
ii.开放隔离器系统的设计允许操作过程中物料通过一个或多个开口连续或半连续进出。开口的设计（如使用连续过压）可以阻断外部污染进入隔离器。

所用技术和工艺的设计应确保在关键区域维持适当的条件，从而保护操作期间暴露的产品。
i. 隔离器：
a.开放式隔离器的设计通过关键区域的初始气流保护和工艺过程中暴露产品上方和周围的单向流吹扫保证 A级条件。
b. 封闭式隔离器的设计通过工艺过程中充分保护暴露产品保证 A 级条件。 在进行简单操作的封闭式隔离器中，气流可能不是完全单向的。 然而， 任何湍流不应增加暴露产品的污染风险。 当生产线包含在封闭式隔离器中时，应通过关键区域的初始气流保护和工艺过程中暴露产品上方和周围的单向流吹扫保证 A 级条件。
c.只当有必要进行产品防护（例如放射性药品） 才可使用负压隔离器， 并且应采用专门的风险控制措施以避免关键区域受到影响

隔离器首次验证中常见的一些测试项包括不限于以下内容

1、软件功能测试，具体内容参见《制药机械（设备）计算机化系统验证指南》GB/Z42344-2023

2、屏障系统完整性

2.1、HEPA完整性测试

测试方法，参见ISO 14644-3

2.2、舱体完整性确认（泄漏率）

可以通过使用压力变化法确定泄漏率。通常在两倍工作压力下进行，因为隔离器静态压差通常为20-50pa，所以初始压力可以设定100pa.

稳定时间：通常至少1min，这个保持灵活性。

测试时长：测试时间尽可能短，以避免温度和压力波动可能造成的影响，一般1.5min。

计算方法如下：

泄漏率标准，结合隔离器的用途，具体情况具体分析

下图源于：PHSS的Clarity in GMP Guidance Plrmaceutical lsolator Leak Integrity Classes and Leak Rates

这里的分级和ISO10648-2里面的不一样，PHSS的泄漏完整性等级是特定于制药隔离器的，而不是通用于所有行业。

即使按最严的标准（1%或者PDA所写的0.5%），现在的隔离器一般也是能做到的，同时正如ISPE在Sterile Production Manufacturing Facility中所提到，对于不与强效或危险产品接触的无菌隔离器和RABS应用，唯一的风险是在去污过程中去污剂的泄漏。而PHSS做过相关的研究，基于洁净室的空调/空气处理系统对任何VHP/VH₂0₂泄漏的稀释作用，计算可以证明即使在5% vol/h的泄漏率下，房间内的VHP浓度也不会达到1ppm的操作员暴露限值（OEL）。

JB/T 20175-2017无菌隔离器

检查用隔离器的小时泄漏率应T不大于1.0%·h^-1

连续生产用隔离器的小时泄漏率应T不大于5.0%·h^-1.

所以泄漏率标准定多少合适？没有固定答案，比较灵活，可以两者结合起来，选个合适的标准。定个1%应该足够了。

2.3、手套完整性确认

依照GB/T25915.7-2010附录E的E.5.3对手套进行检漏

2.4、压差维持能力

压差应验证隔离系统在静态和动态条件下维持舱体正压差的能力。静态条件下压差范围通常为20-50Pa，最高不超过100Pa。动态条件下，可由实验人员在进行模拟无菌检查和空气采样操作的同时记录舱体压差，正常操作时应始终维持正压。

2.5、风速确认

如果隔离器内部是单向流，需要进行风速确认，测试方法参考ISO14644-3&EU Annex1 (测试点高度选择工作区域)。

2.6、气流可视化研究

利用水雾发生器进行静态&动态的烟雾研究。

2.7、VHP消毒效果确认

主要是注意流氓BI的问题，这个之前有聊过

那些年，VHP灭菌过程中遇到的流氓BI

药品GMP指南2023

BI和CI布点位置的考虑和选择：
● 气流流速较快或紊乱的位置，或者在设备、装置、仪器、电机、传送带的下方、玻璃窗下方、角落等。通过气流的直接观察和(或)通过气流的录像分析将会更容易观察到那些会造成去污染挑战的问题区域。
● 温度和湿度分布位点。温度较高和湿度较低的位置应该纳入最差位点分析。 这些温度和湿度点可能更加难以达到预期的杀灭效果。
● 化学指示剂分布变色最差的位置需要纳入最差位点研究。
● 被遮挡的表面。隔离器的气流可能无法将过氧化氢传递到那些位点， 达到期望的杀灭效果。
● 关键区域包括灌装工位、屏障系统干预的部件表面以及与产品直接接触部件的表面等。 这些位点应该被选择作为挑战屏障系统能够连续和有效地达到预期去污染效果的位点。
● 隔离器进口和出口需要包含在最差位点分析中来评估屏障系统，应该包括所有传递的位置如 RTP、传递隔离器和管道连接口。
● 一 般BI放置在隔离器的袖套上和手套的手指上。每个手套支撑架的长度要确定和固定，并且在每次去污染循环中可持续重复（能重现）。

2.8、VHP残留确认

隔离器内过氧化氢残留量应不大于1.5mg/m³（1PPM）

2.9、洁净度确认

悬浮粒子(静态的)、沉降菌、浮游菌和表面微生物，应符合A级空气洁净度的要求。

隔离器的再确认通常包括

● 悬浮粒子、HEPA完整性测试、风速、压差。
● 汽化过氧化氢去污染系统的关键参数确认和汽化过氧化氢去污染验证。
● 相关手套完整性测试、舱体完整性、环境监测等日常数据的回顾等。

隔离器的再验证计划应围绕完整性，去污染程序的有效性，无菌状态的维持能力等关键性能进行评估。再验证的结果应形成记录并保存。此外，在设备使用中，出现运行程序或参数变更、 维护时更换重要配件、发生运行异常并完成维修后、 安装场地变更以及长时间停用后的再启用等情况时，也应进行相应的再验证。

说明：具体的测试项目、评估方法以及不同项目的再确认周期可以灵活制定。

参考文献

1、ISPE Baseline® Guide Volume 3: Sterile Production Manufacturing Facility 2018 Third Edition

2、PHSS：Clarity in GMP Guidance Plrmaceutical lsolator Leak Integrity Classes and Leak Rates

3、ISO14644-3

4、GB/T 25915.7-2010

5、JB/T 20175-2017无菌隔离器

6、USP1229.11

7、药品GMP指南2023